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研究中的結核病診斷技術
2006-03-21
        由于現有結核病細菌學診斷技術存在的技術缺陷,尋找簡便、快速、實用的實驗診斷方法是亟待解決的問題。多年來防治結核病工作者在細菌 學、免疫學、分子生物學等方面進行了大量的、卓有成效的努力,在結核病的實驗診斷中引入了多項技術指標并取得了一定的進燕尾服。建立了一些新的技術和方法。
  1.結核病的免疫學診斷技術:
  近年來報道較多的主要有血清學診斷技術:這項技術起始于19世紀末,主要是檢測血清內的抗結核抗菌素體。它是一種快速、簡便的檢查技術,并且在多種疾病的診斷中得到廣泛的應用。1976年Nassau首先將酶疫吸附試驗(ELISA)法應用于結核病的免疫學診斷以后,由于這種方法具有與同位素檢測相似的靈敏度并避免了同位素的,放射性污染,國內外一直沒有間斷這方面的研究,主要是檢測結核病人血清中的特異性抗體。陽性率在70%-90%,假陽性在4%-8%,這一方法的引入促進了結核病免疫學診斷的進展。存在的主要問題是結核菌的抗原性較弱且屬間和種間共同抗原決定簇的存在及體液免疫與結核病的相關性未得到充分的闡明,致使ELISA這一血清學診斷技術難以取得實質性的進展。
  2.結核病的分子生物學診斷技術:
  20世紀90年代以來,隨著分子生物學在醫學領域取得的飛速發展,研究者也將分子生物學的原理引入了結核病實驗研究范圍。聚合酶鏈反應(PCR)是一種以核酸生物化學為基礎的分子生物學診斷技術,是生物醫學領域內最有價值的研究手段之一。自1989年引入結核病的診斷以來,立即成為結核病細菌 學診斷領域中備受關注的焦點。經過數年的努力積累了大量的資料和經驗,使這一方法不斷完善,其反應靈敏、特異、快速的特性在多數報告中得到肯定。PCR的技術操作并不復雜,但是要求很高的技術質量。因擴增氣溶膠污染而導致的假陽性和因標本中抑制物質存在而導致的假陰性和試劑盒缺乏規范化、標準化是影響PCR結果可信性的關鍵。為此研究人員正在不斷開發出新的高敏度和高特異性的PCR方法,如逆轉錄PCR法、巢式PCR法、單管巢式逆轉錄PCR法、實時熒光PCRE、酶聯PCR等,在一定程度上提高了PCR方法的敏感性和特異性。研究者們還將分子生物學的原理應用于結核菌的耐藥性測定及核酸指紋分析,在耐藥基因的檢測和分子流行病學方面,取得了重大的進展。
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